国产精品区一区二区三在线播放_最近中文字幕视频完整_都市激情校园春色_免费国产成人高清视频网站

當前位置:
首頁 > 技術文章 > CCD841 CON 人正常結腸上皮細胞(有限細胞系)傳代/復蘇操作
目錄導航 Directory
服務熱線
技術支持Article
CCD841 CON 人正常結腸上皮細胞(有限細胞系)傳代/復蘇操作
點擊次數:854 更新時間:2024-01-08

CCD841 CON 人正常結腸上皮細胞(有限細胞系)

,CCD841 CON

貨號:YJ-h322(STR鑒定)

價格: 5000.0

規格: 1*10 6 

細胞介紹

CCD 841 CoN (ATCC CRL-1790) 細胞是拉伸的上皮樣細胞,在培養中生長為扁平且雜亂無章的層。可以觀察到一些圓形細胞堆積在附著的群體上,碎片中等至重。CRL-1790 是一種正常的人類二倍體細胞系,因此它最終會衰老。人口倍增水平 (PDL) 信息可在特定批次的分析證書上找到,并可在 ATCC 網站上找到。

細胞特性

1) 來源:女性 大腸

2) 形態:上皮細胞樣,貼壁生長(貼壁弱,消化時間短,時間過長會導致細胞不長)

3) 含量:>1x10^6 細胞數

4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5) 用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備DMEM 基礎培養基 (YJ-0001),特級胎牛血清10 %  P/S 1%

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。換液頻率:隔天換液。

3) 凍存液:90%FBS,10%DMSO,現用現配。

注意:

1.細胞經過運輸后,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現象。貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,1000rpm(約150g)離心3-5min,棄上清。加5ml PBS重懸細胞,再1000rpm(約150g)離心3-5min,用新鮮的完全培養基重懸接種到新的培養瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗幾次。

2.細胞生長不均時,可以將細胞消化吹散后加入新的培養基重新接種或傳代。

細胞生長緩慢時,可以選擇更換優質胎牛血清或者提高血清濃度(最高不超過20%)培養,也可以根據細胞生長狀態,選擇傳代細胞到新的培養瓶中繼續培養。

二. 細胞處理:

1) 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,置于37℃培養箱中消化1分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,具體以細胞消化到相互分離但未脫落,輕敲幾下可以下來為準,嚴禁消化到細胞完全漂浮,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。 

3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

CCD841 CON 人正常結腸上皮細胞(有限細胞系).png


下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

注意事項

1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。

3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

5.客戶在細胞培養過程中,有技術問題可以聯系咨詢技術售后,我們隨時給予解答。

 

2011年開始我們致力于在生命科學領域生物醫學實驗技術及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯系。

 

實驗技術服務:

 


滬公網安備 31011802001676號

国产精品区一区二区三在线播放_最近中文字幕视频完整_都市激情校园春色_免费国产成人高清视频网站
国产精品又粗又长| 欧美激情亚洲天堂| 中文字幕无码精品亚洲资源网久久| 亚洲精品天堂成人片av在线播放| 国产肉体ⅹxxx137大胆| 色啦啦av综合| 成人在线免费在线观看| 香蕉精品视频在线| 亚洲最大成人在线观看| 久久亚洲中文字幕无码| 亚洲自拍偷拍一区二区三区| www.激情小说.com| 欧美成人黑人猛交| 老太脱裤子让老头玩xxxxx| 欧美性视频在线播放| 三级a三级三级三级a十八发禁止| 黄色免费福利视频| 国产一区二区三区小说| 400部精品国偷自产在线观看| 激情综合网俺也去| 无码精品a∨在线观看中文| 欧美一级视频在线播放| 人人妻人人澡人人爽欧美一区双 | 人妻丰满熟妇av无码区app| 777久久精品一区二区三区无码| 午夜免费看视频| 天天综合天天添夜夜添狠狠添| 熟女人妇 成熟妇女系列视频| 国产综合av在线| 久久久亚洲精品无码| 热99这里只有精品| www.四虎成人| 免费看a级黄色片| 欧美日韩在线观看不卡| 手机免费看av网站| 爱爱爱视频网站| 亚洲精品蜜桃久久久久久| 少妇无码av无码专区在线观看| 国产一区二区在线视频播放| 三年中国国语在线播放免费| 波多野结衣xxxx| 欧美又黄又嫩大片a级| 成人在线观看www| 国产综合av在线| 精品国产鲁一鲁一区二区三区| 中文字幕色呦呦| 99视频精品免费| 青青草视频在线视频| 久久久精品在线视频| 色播五月综合网| 轻点好疼好大好爽视频| 黄色aaa级片| 丝袜人妻一区二区三区| 天天操天天干天天做| www.好吊操| 亚洲va在线va天堂va偷拍| 成人午夜视频免费观看| 超碰影院在线观看| avove在线观看| 男女无套免费视频网站动漫| 国产911在线观看| 国产小视频精品| 成年人网站国产| 亚洲国产午夜精品| 日本一本二本在线观看| 久久久久久久久网| 亚洲视频一二三四| 国产a级一级片| 青春草国产视频| 先锋影音男人资源| 天天爽夜夜爽一区二区三区| 无码播放一区二区三区| 国产亚洲精品久久久久久久| www.色就是色.com| 人妻丰满熟妇av无码区app| 黄页网站在线观看视频| 男人的天堂视频在线| 国产麻豆电影在线观看| 亚洲国产欧美91| 三区视频在线观看| 日本高清久久久| 天天操天天爽天天射| 麻豆av免费在线| 茄子视频成人免费观看| 999在线观看视频| 国产乱子伦精品无码专区| 亚洲综合激情五月| 视色,视色影院,视色影库,视色网| 自拍偷拍21p| 免费网站在线观看黄| 亚洲欧美日韩网站| 国产三级中文字幕| 免费极品av一视觉盛宴| 免费超爽大片黄| 欧美女人性生活视频| 91n.com在线观看| 午夜免费福利网站| 无码熟妇人妻av在线电影| 春日野结衣av| 毛片毛片毛片毛| 日韩a级黄色片| 日日碰狠狠躁久久躁婷婷| 污片在线免费看| 手机福利在线视频| 欧美一区二区三区爽大粗免费| 日本精品一区二区三区四区| 涩涩网站在线看| 日本a在线免费观看| 天天爽天天爽夜夜爽| 国产又黄又爽免费视频| 伊人成色综合网| 日韩视频在线免费播放| 18岁网站在线观看| 在线观看岛国av| 国产视频九色蝌蚪| 做爰高潮hd色即是空| 国产成人无码精品久久久性色| 最新天堂在线视频| 欧美成人一区二区在线观看| 亚洲最大天堂网| 久久精品99国产| 99国产精品白浆在线观看免费| 免费av网址在线| 99热亚洲精品| 精品一区二区三区毛片| 日本特黄a级片| 内射国产内射夫妻免费频道| 蜜臀av.com| 一级片黄色免费| 亚洲这里只有精品| 国产真人无码作爱视频免费| 国产911在线观看| 一级黄色大片儿| 一级黄色特级片| 已婚少妇美妙人妻系列| 欧美成人高潮一二区在线看| 300部国产真实乱| 性久久久久久久久久久久久久| 国产免费视频传媒| 国产精品无码一区二区在线| 欧洲美女和动交zoz0z| 亚欧激情乱码久久久久久久久| 女人喷潮完整视频| 日本韩国欧美在线观看| 国产女主播自拍| www.av蜜桃| 极品美女扒开粉嫩小泬| 日本一区午夜艳熟免费| 日韩 欧美 视频| 欧日韩免费视频| 欧美深夜福利视频| 国产乱子夫妻xx黑人xyx真爽| 日本日本19xxxⅹhd乱影响| 成人在线免费观看av| 人妻内射一区二区在线视频| 午夜视频在线瓜伦| 99re精彩视频| 中文字幕在线视频一区二区| 少妇高潮流白浆| 日韩精品一区在线视频| 日韩av资源在线| 9久久婷婷国产综合精品性色| 天天视频天天爽| 亚洲黄色片免费| 在线观看三级网站| cao在线观看| 亚洲老女人av| 成人在线观看毛片| 国产成人黄色片| 91pony九色| 日韩欧美一区三区| 国产一区二区在线免费播放| 天天做天天爱天天高潮| 日韩美女爱爱视频| 狠狠躁狠狠躁视频专区| 中国黄色录像片| 日韩免费高清在线| av 日韩 人妻 黑人 综合 无码| 黄色国产一级视频| 红桃视频 国产| 欧美日韩在线视频一区二区三区| 亚洲精品www.| 久久无码高潮喷水| 伊人再见免费在线观看高清版 | www.成年人视频| 色婷婷综合久久久久中文字幕| 尤物国产在线观看| 免费网站在线观看视频| 男人舔女人下面高潮视频| 91大神免费观看| 91日韩视频在线观看| 国产www免费| 免费久久久久久| 国产嫩草在线观看| 欧美日韩亚洲一| 黄页网站在线观看视频| 99热都是精品| 在线视频日韩欧美| 免费看黄色一级大片| www.avtt|